基孔肯雅熱PCR檢測(cè)怎么做
基孔肯雅熱PCR檢測(cè)需由專業(yè)醫(yī)療機(jī)構(gòu)通過(guò)采集患者血液樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室分析。該檢測(cè)主要通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)擴(kuò)增病毒RNA，用于確診基孔肯雅病毒感染。
基孔肯雅熱PCR檢測(cè)屬于分子生物學(xué)檢測(cè)方法，需在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境下操作。檢測(cè)流程包括樣本采集、RNA提取、逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA、特異性引物擴(kuò)增及結(jié)果分析五個(gè)核心步驟。醫(yī)療機(jī)構(gòu)通常采用靜脈采血獲取3-5毫升全血樣本，使用EDTA抗凝管保存運(yùn)輸。實(shí)驗(yàn)室會(huì)選用商品化核酸提取試劑盒分離病毒RNA，再通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄酶將RNA轉(zhuǎn)化為cDNA。擴(kuò)增階段采用針對(duì)基孔肯雅病毒非結(jié)構(gòu)蛋白1基因的特異性引物，經(jīng)35-40個(gè)循環(huán)的PCR反應(yīng)后，通過(guò)電泳或熒光探針?lè)ㄅ凶x結(jié)果。整個(gè)檢測(cè)過(guò)程需要6-8小時(shí)，陽(yáng)性結(jié)果可明確診斷現(xiàn)癥感染。由于該檢測(cè)對(duì)實(shí)驗(yàn)室條件和技術(shù)要求較高，基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)需將樣本送至疾控中心或三級(jí)醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。發(fā)熱期前5天內(nèi)的血液樣本檢出率最高，發(fā)病1周后陽(yáng)性率可能下降。
進(jìn)行基孔肯雅熱PCR檢測(cè)前應(yīng)避免擅自服用抗病毒藥物，采樣后保持穿刺部位清潔干燥。確診患者需采取防蚊隔離措施，配合疾控部門開展流行病學(xué)調(diào)查。日常需注意清除居住環(huán)境積水容器，使用蚊帳和驅(qū)蚊劑預(yù)防蚊蟲叮咬，出現(xiàn)持續(xù)高熱伴關(guān)節(jié)痛癥狀應(yīng)及時(shí)就醫(yī)。
