支原體污染怎么處理
支原體污染可通過(guò)紫外線消毒、過(guò)濾除菌、抗生素處理、高溫滅活及細(xì)胞培養(yǎng)試劑清除等方法控制。支原體污染可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果或?qū)е录?xì)胞培養(yǎng)失敗，需根據(jù)污染場(chǎng)景選擇針對(duì)性措施。
1、紫外線消毒
短波紫外線能破壞支原體DNA結(jié)構(gòu)，適用于實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面、器械等物體表面消毒。需確保照射強(qiáng)度達(dá)到每平方厘米90微瓦以上，持續(xù)照射30分鐘以上可有效滅活支原體。操作時(shí)需注意紫外線對(duì)眼睛和皮膚的傷害。
2、過(guò)濾除菌
采用0.1微米孔徑濾膜可物理截留支原體，適用于培養(yǎng)基、血清等液體除菌。需配合無(wú)菌操作技術(shù)防止二次污染，濾膜使用前需用無(wú)菌水潤(rùn)洗，過(guò)濾后需進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè)驗(yàn)證效果。
3、抗生素處理
支原體對(duì)四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素敏感。實(shí)驗(yàn)室常用支原體清除試劑含普那霉素、卡那霉素等成分，需按照說(shuō)明書濃度添加至培養(yǎng)基，連續(xù)處理3代細(xì)胞以上。注意抗生素可能影響細(xì)胞正常代謝。
4、高溫滅活
121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘可徹底滅活支原體，適用于玻璃器皿、金屬器械等耐高溫物品。不耐高溫材料可采用80℃干熱滅菌2小時(shí)，但需注意部分支原體菌株可能存在耐熱性。
5、細(xì)胞培養(yǎng)試劑
專用支原體清除劑如BM-Cyclin含特定抗生素組合，通過(guò)干擾支原體蛋白質(zhì)合成發(fā)揮作用。使用時(shí)需更換含藥培養(yǎng)基3天，配合細(xì)胞傳代操作。嚴(yán)重污染時(shí)建議廢棄原代細(xì)胞重新培養(yǎng)。
預(yù)防支原體污染需建立嚴(yán)格的無(wú)菌操作規(guī)范，定期對(duì)培養(yǎng)箱、超凈臺(tái)進(jìn)行消毒監(jiān)測(cè)。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)規(guī)范使用抗生素，新引進(jìn)細(xì)胞株需進(jìn)行支原體檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)人員需穿戴防護(hù)裝備，避免人為污染。出現(xiàn)污染后應(yīng)追溯污染源，對(duì)相關(guān)區(qū)域進(jìn)行全面消殺，必要時(shí)暫停實(shí)驗(yàn)進(jìn)行環(huán)境整頓。
