乙型肝炎病毒HBV DNA定量檢測主要通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR、核酸雜交法、化學(xué)發(fā)光法和微滴式數(shù)字PCR四種方法實(shí)現(xiàn)。
1、實(shí)時(shí)熒光PCR采用熒光標(biāo)記探針擴(kuò)增病毒DNA片段,檢測下限可達(dá)20 IU/mL,適用于常規(guī)臨床監(jiān)測和抗病毒療效評(píng)估。
2、核酸雜交法通過標(biāo)記核酸探針與病毒DNA特異性結(jié)合,靈敏度約1000拷貝/mL,多用于高病毒載量樣本篩查。
3、化學(xué)發(fā)光法基于抗原抗體反應(yīng)結(jié)合化學(xué)發(fā)光信號(hào)檢測,操作自動(dòng)化程度高,檢測范圍覆蓋50-1×10^8 IU/mL。
4、數(shù)字PCR通過微滴分割實(shí)現(xiàn)單分子擴(kuò)增,絕對(duì)定量不依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線,精度顯著高于傳統(tǒng)方法,適合低病毒載量檢測。
檢測前需空腹8小時(shí),避免劇烈運(yùn)動(dòng),不同檢測方法參考值范圍差異較大,建議結(jié)合肝功能指標(biāo)綜合解讀報(bào)告。